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ME-Calcium甘露醇糖类檢測專用柱

发布时间: 2018-09-17 10:28   1545 次浏览



ME-Calcium系列色譜柱专爲高效分离制备水溶性或部分水溶性的有机化合物而设计,可用于分离糖类、有机酸、多肽和细胞代谢物中的生物有机小分子。ME-Calcium系列固定相是在低交聯度(5%、8%和10%)的聚苯乙烯/二乙烯基苯(PS/DVB)颗粒(5、10 ?m)表面键合磺酸基团(-SO3H),即爲ME-Calcium填料;若在此填料上继续络合不同的離子则形成不同類型的填料。如络合離子爲钙離子(Ca2+),则爲ME-Calcium填料;如络合離子爲铅離子(Pb2+),则爲ME-Calcium Pb填料;如络合離子爲钾離子(K+),则爲ME-Calcium 填料;如络合離子爲钠離子(Na+),则爲ME-CalciumN填料。

                                                 

5和10 μm ME-Calcium填料电镜圖



ME-Calcium色譜柱技術參數表


 


類型

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

ME-Calcium

基質

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

PS/DVB

粒徑 (μm)

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

5, 10

交聯度

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

5%, 8% and 10%

固定相

-SO3H

-(SO3)2Ca

-(SO3)2Pb

-SO3K

-SO3Na

pH穩定性

1 – 3

5 – 9

5 – 9

5 – 9

5 – 9

******耐壓 
(psi) (1)

10% 交聯度

10 μm

1,500

1,500

1,500

1,500

1,500

5 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

8% 交聯度

10 μm

1,000

1,000

1,000

1,000

1,000

5 μm

800

800

800

800

800

5% 交聯度

10 μm

600

600

600

600

600

5 μm

400

400

400

400

400

推薦流動相

2.5 mM H2SO4
0.1% H3PO4

H2O

H2O

H2O

H2O

推薦流速
(mL/min)(2)

7.8x300 mm

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

0.4-0.8

4.6x300 mm

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

0.1-0.30

******耐受溫度 (oC)

85

85

85

85

85


(1) 對于7.8x300 mm柱在******溫度下而言,並扣除儀器的背壓。
(2)
對于固定相爲5 μm5%交聯度树脂、規格爲7.8x300 mm柱的流速是0.1 to 0.15 mL/min



ME-Calcium甘露醇糖类檢測專用柱特点:

● 均匀一致的粒徑确保了高分辨率和分离的高效性


● 交聯度:5%、8%和10%


● 与绝大多数水系流動相容(包括纯水)


● 離子形态选择范围宽:H+、Ca2+、Pb2+、K+和Na+


● ME-Calcium柱的pH适用范围爲1~3,其他類型ME-Calcium柱的pH适用范围爲5~9


● 包括分析柱和制备柱


均一的粒徑


 


    ME-Calcium 固定相粒徑分布极窄,5 ?m5.0±0.2 ?m10 ?m10.0 ± 0.2 ?m。如此均一的粒徑分布确保了赛分产品具有高的分离效率和回收率。圖1表明,分離單糖試驗中,ME-Calcium 色譜柱比其他品牌産品具有更高的分離效率。


 


1. 相同分離條件下,在ME-Calcium (5 ?m, 8%交聯度, 7.8 x 300 mm)柱和其它品牌相同規格鈣柱上分離6種單糖效果對比。 


 


17.jpg

流動相:     H2O
流速:         0.60 mL/min
溫度:         85
進樣量:     20 μL
檢測:         RI

 


 


不同離子態


 


    ME-Calcium樹脂多種可選離子態使得賽分ME-Calcium系列柱可广泛用于各种不同基質中糖分子、糖醇和其他水溶性物质的优质分离。例如,树胶醛糖、核糖醇、阿糖醇很难在H柱上分離,卻能在Ca柱上實現完美分離;木糖、半乳糖和甘露糖在Ca柱上是一個重疊峰,而在Pb柱上則能夠依次單獨流出。


 


不同離子態的选择


離子

應用

H

發酵産物、含有機酸的果汁、醇類和糖類

Ca

含大量果糖的玉米糖漿中的糖類、尤其適用于單糖、二聚糖、三聚糖、四糖及糖醇的分離

Pb

木制品中的戊糖簣D禾
含有蔗糖、乳糖等的奶制品

K

蔗糖、蜜糖、玉米糖浆、甜菜糖及其他含有糖类植物产品(含有甜菜碱、三甲基氯化铵等两性離子的)
甘草膦

Na

低聚糖,尤其在含有大量无机钠離子的情况下,如蜂蜜。


 


低交聯度


 


    ME-Calcium树脂的低交聯度使其在流動相中可以适当的溶胀,尤其在高温条件下这是实现大多数分离任务的典型模式。这种溶胀可以优化分离时的比表面积、渗透性、容量、选择性,及改变離子强度。PS/DVB粒子的交聯度越低,树脂结构就越开放,从而使更大分子量的多聚糖也有良好渗透性。圖2表明,在5% ME-Calcium 柱上,聚己糖(G6)可以很好的从基質中分离,并且还能看到聚庚糖(G7)和聚辛糖(G8)的兩個峰得到了分離;而在8% ME-Calcium上不但沒有G7G8的峰,連G6的峰都不太明顯。


 


2. 不同交聯度ME-Calcium (5 ?m, 7.8 x 300 mm)柱上麥芽糊精和甘油的流出曲線


 


色譜柱:      ME-Calcium Ca-NP5
流動相:      H2O
流速:          0.20 mL/min
溫度:          85
進樣量:      20 ?L 
檢測波长:   192 nm
樣品:       Glucidex (100 mg/mL) and glycerol (10 mg/mL) (G3 to G7 refer to oligosaccharides)
 

 

car22.jpg


 


优异的穩定性


 


    ME-Calcium HPLC柱优良的制造工艺和先进的填装技术保证了其具有高的穩定性。即使是在升高溫度的条件下,ME-Calcium树脂也能在纯水和其他水缓冲体系中保持稳定。圖3表明,55下,6天內連續沖洗578倍柱體積,酸的保留時間僅改變了1%


 


3. ME-Calcium  (5 ?m, 8%交聯度)55下連續用5 mM H2SO4冲洗后分离有机酸色谱圖


20.jpg


 

色譜柱:    4.6x 250 mm 
流動相:    5 mM H2SO4
流速:        0.30 mL/min    
溫度:        55
進樣量:     20 ?L        
檢測:         RI
樣品:         1, Citric acid (50 mM); 2, Acetic acid (100 mM)

 

 


 


穩定的批間重現性


 


    由于采用了可控的表面化學修飾技術並嚴格監控聚合物樹脂的生産過程,ME-Calcium柱具有很高的批间重现性。圖4表明,不同批次間的保留時間誤差在0.3%以內。


 


4. 三個不同批次ME-Calcium (10 ?m, 8%交聯度)柱分离有机酸色谱圖


20.jpg


 

色譜柱:   7.8x300 mm         
流動相:   2.5 mM H2SO4 
流速:       0.6 mL/min           
溫度:       55
進樣量:    5 ?L                
檢測:        RI
樣品:        Mixture of Citric acid, Succunic acid, Formic acid, Acetic acid


 


 
多種分離機理共同作用


 


    ME-Calcium树脂表面的抗衡離子(H+Ca2+Pb2+K+Na+)能缓和分离过程。通常,分离的过程涉及两种或两种以上的机理同时作用,包括体积排阻、離子排斥、離子交换、配体交换、反相作用及正相作用。对多糖类樣品来说,体积排阻机理是主要的作用机理,如圖4中寡聚糖的分離。而分離單糖時的主要機理則主要是配位效應,例如Ca型柱中分離葡萄糖的αβ-异构体。在实现蜂蜜樣品的分离过程中,首要的机理爲離子排斥作用,该作用使得无机钠離子通过孔隙被洗脱下来。而体积排阻和配体交换作用则依次作用于寡聚糖和单糖的分离。對于分离有机酸用的ME-Calcium H型树脂来说,反相作用和離子排阻作用均爲首要机理。疏水性和pKa同时影响樣品组成的保留时间。这一特性使得ME-Calcium型樹脂非常適合于監測發酵過程中成分的變化。


 


 


ME-Calcium



産品名稱

粒度

交聯度

規格

訂貨號

ME-Calcium

10 ?m

5%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 ?m

5%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 ?m

5%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 ?m

5%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 ?m

5%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 ?m

5%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 ?m

8%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 ?m

8%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 ?m

8%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 ?m

8%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 ?m

8%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 ?m

8%

10x300 mm

511331-10030

ME-Calcium

10 ?m

10%

4.6x50 mm

511331-4605

ME-Calcium

10 ?m

10%

4.6x300 mm

511331-4630

ME-Calcium

10 ?m

10%

7.8x50 mm

511331-7805

ME-Calcium

10 ?m

10%

7.8x100 mm

511331-7810

ME-Calcium

10 ?m

10%

7.8x300 mm

511331-7830

ME-Calcium

10 ?m

10%

10x300 mm

511331-10030




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