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液相色譜柱使用的七大误区

发布时间: 2018-12-09 18:00   1253 次浏览

色谱柱在色譜儀分析系统中起着分离作用,是色谱分析的核心部件。正确使用和维护色谱柱尤为重要,使用不当就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。以下从七个方面简答介绍液相色譜柱在使用过程中应当着重注意的问题。





1

避免壓力和溫度的急劇變化

溫度的突然變化或者使色譜柱從高處掉下都會影響柱內的填充狀況;柱壓的突然升高或降低也會沖動柱內填料,因此在調節流速時應該緩慢進行,以保持色譜柱內填料的穩定性。




2

避免直接改變溶劑的組成

在需要改变检测样品溶液组成是,应逐渐改变溶剂的组成,特别是反相色谱中,不应直接从有机溶剂改变为全部是水,反之亦然。且在使用次洗脱能力强的 洗脱液冲洗色谱柱时,对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂逐渐过渡,每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右,即常规分析需要50~75ml。








3

避免色譜柱反沖

一般來說色譜柱不能反沖,只有色譜柱使用說明書上標明該柱可反沖才可以反沖除去留在柱頭上的雜質。否則,反沖色譜柱的影響是迅速降低柱效。




4

避免流動相使用不當而破壞固定相

選擇使用適宜的流動相(尤其是pH),以避免固定相被破壞。有時可以在進樣器前面連接一段預柱,分析柱是鍵合矽膠時,預柱爲矽膠,可使流動相在進入分析柱之前預先被矽膠"飽和",避免分析柱中的矽膠基質被溶解。




5

禁止樣品未經處理直接進入色譜柱

避免將基質複雜的樣品尤其是生物樣品直接注入柱內,需要對樣品進行預處理或者在進樣器和色譜柱之間連接一保護柱。保護柱一般是填有相似固定相的短柱。保護柱可以而且應該經常更換。








6

禁止將緩沖溶液長時間存放在色譜柱內

保存色譜柱時應將柱內充滿乙腈或甲醇,柱接頭要擰緊,防止溶劑揮發幹燥。******禁止將緩沖溶液留在柱內靜置過夜或更長時間。




7

禁止色譜柱未經處理直接封存

色谱柱使用完成之后须使用相宜溶剂进行清洁处理,例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡;当采用盐缓冲溶液作流动相时,使用完后应用无盐流动相冲洗;含卤族 元素(氟、氯、溴)的化合物可能会腐蚀不锈钢管道,不宜长期与之接触;装在液相色譜儀上的色谱柱如不经常使用,应每隔4-5天开机冲洗15分钟。

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